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大鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞凍存需要注意哪些事項(xiàng)?

更新時(shí)間:2020-09-27點(diǎn)擊次數(shù):1904
  大鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞呈葡萄狀,均為處于不同發(fā)育時(shí)期的卵泡,卵泡呈黃色,卵巢表面密布血管。卵巢的大小與年齡和產(chǎn)卵期有關(guān),大多數(shù)脊椎動(dòng)物有兩個(gè)卵巢,但是部分魚(yú)類的兩個(gè)卵巢融合為單個(gè)結(jié)構(gòu),而所有鳥(niǎo)類只有左側(cè)卵巢有機(jī)能。卵巢是位于子宮兩側(cè)的一對(duì)卵圓形的生殖器官,它的外表有一層上皮組織,其下方有薄層的結(jié)締組織。
  少突膠質(zhì)前體細(xì)胞來(lái)自于胚胎發(fā)育期早期神經(jīng)管神經(jīng)上皮細(xì)胞,隨著中樞神經(jīng)系統(tǒng)的發(fā)育,逐步遷移、增殖并分化為具有形成中樞神經(jīng)系統(tǒng)軸突髓鞘、保護(hù) 和營(yíng)養(yǎng)軸突等功能的成熟少突膠質(zhì)細(xì)胞,遍布于中樞神經(jīng)系統(tǒng)的灰質(zhì)和白質(zhì),尤以白質(zhì)為多。
  細(xì)胞凍存:
  1)細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)瓶的80%面積時(shí),棄25cm2培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)液,用PBS清洗細(xì)胞一次;
  2)添加0.125%胰蛋白酶消化液約2ml至培養(yǎng)瓶中,倒置顯微鏡下觀察,待細(xì)胞回縮變圓后輕輕吹打細(xì)胞使之脫落,再加入*培養(yǎng)液終止消化,然后將懸液轉(zhuǎn)移至15ml離心管中,1500rpm/min,離心5min;
  3)用適當(dāng)量的凍存液重懸細(xì)胞,并放置于凍存管中;
  4)先將細(xì)胞凍存管放置于-20℃ 1.5h,然后將其移入-80℃過(guò)夜,24h后轉(zhuǎn)入液氮中進(jìn)行長(zhǎng)期保存。
  大鼠少突膠質(zhì)前體細(xì)胞注意事項(xiàng)
  1、培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個(gè)月;
  2、在細(xì)胞培養(yǎng)過(guò)程中,請(qǐng)注意保持無(wú)菌操作;
  3、該細(xì)胞只可用于科研。
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