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小鼠骨髓內(nèi)皮祖細胞的鑒定方法

更新時間:2020-06-18點擊次數(shù):2037
  小鼠骨髓內(nèi)皮祖細胞來源內(nèi)皮祖細胞分離自骨髓;骨髓是機體的造血組織,位于身體的許多骨骼內(nèi)。
  成年動物的骨髓分兩種:紅骨髓和黃骨髓。紅骨髓能制造紅細胞、血小板和各種白細胞。血小板有止血作用,白細胞能殺滅與抑制各種病原體,包括細菌、病毒等;某些淋巴細胞能制造抗體。因此,骨髓不但是造血器官,它還是重要的免疫器官。骨髓是存在于長骨(如肱骨、股骨)的骨髓腔和扁平骨(如髂骨)的稀松骨質(zhì)間的網(wǎng)眼中,是一種海綿狀的組織,能產(chǎn)生血細胞的骨髓略呈紅色,稱為紅骨髓。
  小鼠骨髓來源內(nèi)皮祖細胞采用沖洗骨髓、密度梯度離心、差速貼壁法結合內(nèi)皮細胞培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來。
  小鼠骨髓內(nèi)皮祖細胞的方法及其鑒定和生物學特性。方法:密度梯度離心法分離獲取小鼠骨髓單核細胞,培養(yǎng)于培養(yǎng)液中,每天于倒置顯微鏡下觀察EPC的形態(tài)。應用細胞免疫熒光法、流式細胞技術鑒定EPC表面抗原標志CD34、血管內(nèi)皮生長因子受體,熒光顯微鏡檢測EPC吞噬DiI標記的乙?;兔芏戎鞍准敖Y合FITC標記的荊豆凝集素功能。
  注意事項
  1. 培養(yǎng)基于4℃條件下可保存3-6個月。
  2. 在細胞培養(yǎng)過程中,請注意保持無菌操作。
  3. 傳代培養(yǎng)過程中,胰酶消化時間不宜過長,否則會影響細胞貼壁及其生長狀態(tài)。
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