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當(dāng)前位置:首頁技術(shù)文章大鼠肝S9含有豐富的藥物代謝酶

大鼠肝S9含有豐富的藥物代謝酶

更新時(shí)間:2020-03-19點(diǎn)擊次數(shù):2030
   大鼠肝S9是大鼠肝實(shí)質(zhì)細(xì)胞勻漿液的去線粒體上清液,包含了大量的CYPs等藥物代謝酶,其在藥物體外代謝的研究中具有快速簡(jiǎn)便、靈敏、經(jīng)濟(jì)且可進(jìn)行高通量篩選的特點(diǎn),因此常用作體外研究藥物代謝和藥物相互作用的工具。
   許多致癌劑的生物轉(zhuǎn)化是依靠細(xì)胞內(nèi)微粒體混合功能氧化酶系來完成的,所以肝S9是許多體外研究致癌劑生物轉(zhuǎn)化的活化系統(tǒng)。傳統(tǒng)的肝S9誘導(dǎo)劑為多氯聯(lián)苯,其誘導(dǎo)效果比單獨(dú)用β-奈黃酮要好,但其是致癌劑,一種嚴(yán)重的環(huán)境污染物,現(xiàn)許多國(guó)家已禁止生產(chǎn)?,F(xiàn)研究表明聯(lián)合誘導(dǎo)法可以達(dá)到多氯聯(lián)苯誘導(dǎo)的效果,通過優(yōu)化β-奈黃酮聯(lián)合誘導(dǎo)法以及肝S9制備方法可以獲得高產(chǎn)量的大鼠肝S9以及較高的P450酶含量。
   來源于肝臟內(nèi)質(zhì)網(wǎng)膜的亞細(xì)胞組分,含有豐富的藥物代謝酶,是有價(jià)值的研究藥物代謝和藥物相互作用的工具,主要用于評(píng)價(jià)藥物或候選化合物代謝穩(wěn)定性。大鼠肝S9采用螺旋涂布法和試驗(yàn)方法對(duì)市售和自制兩種來源S9活化的陽性結(jié)果進(jìn)行比較,并加入甘油保護(hù)劑,建立S9酶系統(tǒng)低溫儲(chǔ)存方法,使其以液態(tài)保存于-20℃冰箱中。
   肝S9是肝組織勻漿經(jīng)過9000g離心后的上清部分,簡(jiǎn)稱為S9。S9是完整肝細(xì)胞去除細(xì)胞核、線粒體及大的碎片之后的部分,原則上保留了定位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)上的微粒體蛋白,溶解在細(xì)胞漿液中的蛋白,以及各種細(xì)胞內(nèi)容物質(zhì),如NADPH、UDPGA、PAPS等啟動(dòng)藥物代謝反應(yīng)的輔助因子。S9可以擴(kuò)展微粒體研究的范圍,但是引起所含有的輔助因子(也稱輔酶)量少,實(shí)驗(yàn)時(shí)還是需要添加這些因子,以便實(shí)驗(yàn)順利開展。    
 
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